牛痘病毒（VACV/VV）-溶瘤病毒服务-CRO服务

图1 牛痘病毒结构示意图（PMID:15249657）

牛痘病毒（Vaccinia virus，VACV）是体积最大、结构最复杂、有包膜的双链线性DNA病毒，长度约190 kb，可编码约200个基因。病毒粒子呈砖形，大小约为300x240x120 nm。病毒宿主范围广，可插入外源基因容量大；VV病毒在细胞质内复制增殖，不整合到宿主细胞基因组内。

溶瘤痘苗病毒对肿瘤具有天然的趋向性，研究工作者为了进一步提升靶向性和特异性，对其进行了改造，目前主流的改造方式有两种：

（1）缺失痘苗病毒生长因子(vaccinia growth factor, VGF)

（2）缺失胸腺激酶( Thymidine kinase, TK)

VV的生长因子（VGF）基因与表皮生长因子（EGF）同源，可与细胞表面的EGF受体（EGFR）结合，激活Ras通路，进一步启动细胞周期并促进细胞分化，而细胞分化又会促进TK的合成，提高病毒的感染效率。这对于病毒在正常的细胞中扩增十分重要，而在本身可以大量增殖的肿瘤细胞是非必需的。

目前VV毒株株型中Western Reverse株、Lister株、Wyeth株和Copenhagen株具有溶瘤特性，其中Western Reverse株溶瘤特性最强。

服务内容

劲帆医药可设计生产缺陷型牛痘病毒，即对Western Reverse（WR）株进行特定基因位点敲除，如J2R（TK）、A56R（血凝素）、F14.5等基因，能够使其在正常细胞中不能有效复制且具有肿瘤选择性，同时插入外源基因，如粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、白介素-6（IL-6）等可以增强免疫反应。为了进一步提高其肿瘤靶向性和安全性，可按照客户需求进行牛痘病毒基因改造。

部分oVVs改造策略

名称	株系	改造方式
VV-GM-CSF-Lact	L-IVP	敲除TK和VGF，插入GM-CSF和Lact
GL-ONC1	GLV-1h68	敲除非必需基因，插入Ruc-GFP，β-glucuronidase和β-galactosidase
hV01	惠氏株或WR株	敲除TK和VGF，并插入IL-21

产品现货

现货产品	产品编号	产品内容	荧光	周期（工作日）	滴度(PFU/mL )	总量 PFU
VACV (WR株)	VV01001	VV-ΔTK+T7-RNA聚合酶	无	5-10	≥1.00E+9	1.00E+09
	VV01002	VV-ΔTK+EGFP	绿色		≥1.00E+9	1.00E+09
	VV03001	VV-ΔA56R-ΔTK	无		≥1.00E+9	1.00E+09
	VV03002	VV-ΔTK+EGFP-ΔI4L	绿色		≥1.00E+9	1.00E+09