蛋白表达-蛋白及VLP服务-CRO服务

重组蛋白在细胞基因治疗和再生医学领域的研究、开发和生产中至关重要。蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系。通过这个体系可以实现外源基因在宿主中表达的目的。劲帆医药拥有多种重组蛋白表达系统，提供从基因合成、载体构建到蛋白表达、纯化的一站式服务，可根据客户需求，选用不同表达/纯化标签、表达宿主等，交付能够满足您不同研究需求的蛋白，确保您的研究项目顺利完成。

不同蛋白表达系统特点及生产周期

哺乳动物细胞瞬时表达系统

BEV-昆虫细胞表达系统

酵母表达系统

大肠杆菌表达系统

周期: 4-6周

周期: 4-8周

周期:6-10周

周期: 2-6周

• 高效表达载体

• 高密度细胞培养

• 专用前导序列和接头

• 优化筛选的哺乳动物细胞表达系统

• 优化的表达载体

• 高效表达胞内和胞外蛋白

• 大规模蛋白表达生产能力

• 高滴度病毒包装技术

• 简单的培养条件

• 多种胞内、胞外表达方案

• 优化筛选高表达菌株

• 大规模蛋白表达生产能力

• 快速、经济

• 多种表达载体和E.coli感受态细胞

• 丰富的周质空间表达经验

• 多种蛋白纯化和蛋白复性技术

产品信息

哺乳动物细胞瞬时表达系统 BEV-昆虫细胞表达系统酵母表达系统大肠杆菌表达系统

哺乳动物细胞瞬时表达系统是一种真核表达系统，优势在于能够指导蛋白质的正确折叠，提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能，因而表达产物在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子。

服务内容及周期

服务内容	交付内容	周期
载体构建	• 合成质粒图谱 • 构建质粒及对应图谱	1-4周
小试表达及纯化（100mL）	• 蛋白鉴定报告（纯度，得率） • 蛋白样品（按实际情况交付）	2-4周
大量表达及纯化	• 蛋白鉴定报告（纯度，得率） • 成品蛋白（依据表达小试结果约定）	2-3周

表达载体选择

分类	名称	特征及运用
胞内表达	pCDNA3.1系列载体	常规胞内表达，可选择在标签位置和标签类型
分泌型表达	pCDNA3.1-sp系列载体	常规胞外表达，可选择在标签位置和标签类型
宿主细胞	• HEK293

BEV-昆虫细胞表达系统是一种真核表达系统，利用杆状病毒作为外源基因的载体，通过感染昆虫细胞或者昆虫幼虫来表达外源蛋白的系统。常用于难表达的蛋白、抗原蛋白以及无内毒素的蛋白产品。

服务内容及周期

服务内容	交付内容	周期
载体构建	• 合成质粒图谱 • 载体图谱	1-4周
杆粒及P1/P2代病毒制备	• 转染荧光图片 • 病毒滴度	1-4周
小试表达/小试表达纯化（二选一，100mL）	• 蛋白鉴定报告（纯度，得率） • 蛋白样品（按实际情况交付）	1-2周
大量表达及纯化（1L左右）	• 蛋白鉴定报告（纯度，得率） • 成品蛋白（依据表达小试结果约定）	1-3周

表达载体选择

分类	名称	特征及运用
胞内表达	pFastBacDual	常规胞内表达
分泌型表达	pFastBacDual-gp64sp pFastBacDual-HBMsp	常规胞外分泌表达
宿主细胞	• SF9昆虫细胞 • SF21昆虫细胞 • High Five昆虫细胞

酵母表达系统是一种真核表达系统，，但是兼具原核以及真核表达系统的优点，在基因工程领域中得到广泛的应用。此系统具有翻译后修饰功能，同时生产成本低廉，细胞密度高可进行高密度发酵，是一种强有力的大规模蛋白生产系统。

服务内容及周期

服务内容	交付内容	周期
载体构建	• 合成质粒图谱 • 构建质粒及对应图谱	1-4周
亚克隆	• 菌株筛选结果	1-2周
高通量筛选	• 菌株筛选结果	1-2周
表达测试	• 小试发酵结果 • SDS-PAGE电泳图 • WB检测图	1-2周
样品纯化及制样	• 放大发酵数据 • 蛋白样品（50-1000μg）	2-4周

表达载体选择

分类	名称	特征及运用
常规表达	pPICZα系列和pGAPZα系列	分泌型表达，组成型启动子AOX或GAP，高拷贝表达水平
胞内表达	pPICZ系列和pGAPZ系列	胞内表达，组成型启动子AOX或GAP，高拷贝表达水平
宿主细胞	• X-33毕赤酵母：基因型为野生型，表型为Mut+ • GS115毕赤酵母：基因型为HIS4，表型为Mut+ • SMD1163毕赤酵母：基因型为aox1::ARG4, arg4，表型为MutS, Arg+

大肠杆菌表达系统是一种原核表达系统，因其具有背景清晰、操作简便、表达量高和经济实惠等特点，已成为应用最为广泛的蛋白表达系统。

服务内容及周期

服务内容	交付内容	周期
载体构建	• 合成质粒图谱 • 载体图谱	1-4周
小试表达和纯化	• 表达评估报告（3个表达条件尝试，表达鉴定和可溶性分析） • 样品纯化 • 蛋白鉴定报告（纯度，得率） • 成品蛋白（依据表达小试结果约定50-1000μg）	2-3周
大批量表达1-10mg 按照客户需求	• 放大发酵数据 • 蛋白样品	1-3周

表达载体选择

分类	名称	特征及运用
常规表达	pET-28a/pET-24b系列	小分子HIS标签，胞内表达；常规性可溶蛋白表达
融合表达	pET-42b/pET-28a-sumo/ pET-28a-MBP/pET-28a-TrxA	融合常规GST/sumo/MBP/TrxA标签；提升表达量稳定和促进蛋白溶解
分泌表达	pET-12a/pET-22b/pET-25b	ompT或pleB信号肽，分泌型表达；特殊的分泌蛋白表达
低温表达	pCold I/pCold-sumo/pCold-sumo-MBP/pCold-GST等	低温表达载体，蛋白可溶性表达，增强了活性蛋白的表达比率；常用于易形成包涵体的蛋白表达
宿主细胞	• BL21 (DE3)：常规大肠杆菌表达 • BL21 (DE3) pLysS：适合用于毒性蛋白表达 • Rosetta (DE3) pLysS：适合真核基因表达 • Rosetta-gamiB (DE3)：有利于二硫键形成和蛋白折叠

CRO服务

蛋白表达

不同蛋白表达系统特点及生产周期

产品信息

应用案例

1.可溶蛋白表达

2.难表达蛋白优化

3.分泌性表达

4.胞内表达及纯化

5.HEK293瞬时表达抗体片段

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CDMO服务

技术平台

1.可溶蛋白表达：

2.难表达蛋白优化：

3.分泌性表达：

4.胞内表达及纯化：

5.HEK293瞬时表达抗体片段：