多次跨膜蛋白(multipass membrane protein,MMP)是一类包含2个或多个跨膜结构域的蛋白,参与多种信号转导以响应细胞对外界的刺激,在维持细胞结构、促进细胞通讯、调节细胞内外分子运输等方面发挥了重要作用。许多人类疾病都与多次跨膜蛋白功能异常密切相关,如癌症、呼吸系统疾病、代谢疾病、自身免疫性疾病等,因此多次跨膜蛋白成为了理想的药物作用靶点。MMP主要类型包括G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCR)、离子通道(ion channel)和转运蛋白(transporter)等。
病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)是由病毒单一或多个结构蛋白自行装配而成的高度结构化的蛋白颗粒,在形态结构上与天然的病毒颗粒相似,具有很强的免疫原性和生物学活性。与传统减毒疫苗相比,VLPs缺乏调节蛋白和感染性核酸,无复制能力,其结构上与病毒粒子类似,保留了强免疫原性。
VLPs可分为以下两种类型:
● 非包膜VLPs:是由单个或多个衣壳蛋白组成的结构相对简单的VLPs,可以在原核和真核系统中表达,如人乳头瘤病毒(HPV)VLPs疫苗。
● 包膜VLPs:以矩阵形式包裹在来源于宿主的含有糖蛋白的脂膜中,其结构更加复杂且在生产中更具有挑战性,这些复杂的VLPs通常在真核表达系统表达,例如酵母、昆虫细胞和植物细胞,它需要共表达几种结构蛋白用于细胞内的自组装过程。
VLPs的分类(Yan D et al., Applied microbiology and biotechnology, 2015)
非包膜VLPs单体蛋白通常在大肠杆菌或酵母中表达,这两种系统具有表达量高且易放大优势。包膜VLPs在自组装及释放过程中需要表达细胞系的脂膜结构,仅适用于真核表达,其中以杆状病毒系统为主。
VLPs制备流程(Lua LH et al., Biotechnology and bioengineering, 2014)
劲帆医药搭建了基于昆虫杆状病毒表达系统的VLPs技术平台,利用病毒样颗粒形成的特点,将多次跨膜蛋白完整的展示在VLPs表面。
服务步骤 |
内容 |
交付周期 |
分析及方案制备 |
(1)了解客户要求 (2)分析VLPs表达特征 (3)根据客户要求及VLPs特征制定方案 |
1-2周 |
载体构建 |
(1)基因合成及密码子优化(可选) (2)片段构建至合适的表达载体 |
1-3周 |
表达及包装测试 |
(1)检测蛋白表达情况 (2)蛋白样品纯化 (3)VLps组装及纯化 |
2-5周 |
交付材料 |
(1)蛋白样品 (2)VLPs病毒样颗粒样品(如果有) (3) 项目报告及产品说明 |
1周 |
服务流程
技术优势
(1)VLPs在形态结构、抗原性等方面与天然病毒非常相似,因而可替代天然病毒颗粒用于免疫测定。
(2)VLPs具有良好的结构可塑性,可以通过嵌合或耦合灵活地修饰以改变其组织细胞靶向性或免疫原性,让特定的抗原具有VLPs的能力,引起机体产生强烈的免疫应答。
(3)VLPs具有独特的承载DNA及其他分子的能力,可作为基因的运载工具。
货号 |
靶点 |
产品名称 |
标签 |
靶点类型 |
VLP-000 |
- |
VLP Control |
- |
- |
VLP-001 |
Claudin 18.1 |
Human Claudin 18.1 VLP (Full Length) |
Flag |
四次跨膜 |
VLP-002 |
Claudin 18.2 |
Human Claudin 18.2 VLP (Full Length) |
Flag |
四次跨膜 |
VLP-003 |
Claudin 4 |
Human Claudin 4 VLP (Full Length) |
Flag |
四次跨膜 |
VLP-004 |
Claudin 6 |
Human Claudin 6 VLP (Full Length) |
Flag |
四次跨膜 |
VLP-005 |
CD63 |
Human CD63 VLP (Full Length) |
Flag |
四次跨膜 |
VLP-006 |
CD81 |
Human CD81 VLP (Full Length) |
Flag |
四次跨膜 |
VLP-007 |
CD20 |
Human CD20 VLP (Full Length) |
Flag |
四次跨膜 |
VLP-008 |
GPRC5D |
Human GPRC5D VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-009 |
CCR2 |
Human CCR2 VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-010 |
CCR4 |
Human CCR4 VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-011 |
CCR5 |
Human CCR5 VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-012 |
CCR6 |
Human CCR6 VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-013 |
CCR7 |
Human CCR7 VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-014 |
CCR8 |
Human CCR8 VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-015 |
GLP-1R |
Human GLP-1R VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-016 |
CXCR3 |
Human CXCR3 VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-017 |
CXCR4 |
Human CXCR4 VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-018 |
CXCR5 |
Human CXCR5 VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-019 |
CXCR6 |
Human CXCR6 VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-020 |
C5AR1 |
Human C5AR1 VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-021 |
GCGR |
Human GCGR VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-022 |
SSTR2 |
Human SSTR2 VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-023 |
CGRPR |
Human CGRPR VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-024 |
PAC1 |
Human PAC1 VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-025 |
CB1 |
Human CB1 VLP (Full Length) |
Flag |
GPCR |
VLP-026 |
ASCT2 |
Human ASCT2 VLP (Full Length) |
Flag |
转运蛋白 |
VLP-027 |
SLC7A11 |
Human SLC7A11 VLP (Full Length) |
Flag |
转运蛋白 |
VLP-028 |
SLC3A2 |
Human SLC3A2 VLP (Full Length) |
Flag |
转运蛋白 |
VLP-029 |
SLC7A5 |
Human SLC7A5 VLP (Full Length) |
Flag |
转运蛋白 |
VLP-030 |
ENT2 |
Human ENT2 VLP (Full Length) |
Flag |
转运蛋白 |
服务流程及周期
1. VLP表面目标蛋白丰度高
2. SEC-HPLC检测C5AR1 VLP纯度高于90%
3.活性验证(Immobilized human C5AR1 at 10 μg/ml can bind Anti-C5AR1 recombinant antibody, the EC50 is 1.239-3.760 ng/mL.)
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