劲帆生物医药科技（武汉）有限公司（简称“劲帆医药”）创立于2022年，专注于为全球客户提供病毒载体、蛋白及疫苗领域的一站式CRO/CDMO服务。目前已开发溶瘤病毒改造一站式CRO，依托定制化改造、工艺开发、药效评价三大技术服务平台，构建溶瘤病毒改造全链条服务体系，助力客户加速溶瘤病毒药物的研发与产业化。

溶瘤病毒的遗传修饰（图片来源：Lan Q et al, Front Med., 2020）

劲帆医药已成功开发了多种溶瘤DNA病毒和RNA病毒改造技术，涵盖了病毒毒株的重组、突变、拯救以及扩增等关键环节。其中所设计的病毒类型丰富多样，包括但不限于单纯疱疹病毒（Herpesvirus，HSV）、腺病毒（Adenovirus，AdV）、牛痘病毒（Vaccinia Virus，VACV）、水泡性口炎病毒（Vesicular Stomatitis Virus，VSV）及呼肠孤病毒（Reovirus，ReV）等，可提供广泛而深入的技术支持与服务，满足不同客户在溶瘤病毒研究与开发过程中的多样化需求。

1. 病毒类型简介

（1）单纯疱疹病毒（HSV）

HSV因具备感染宿主范围广、复制周期短以及基因组容量大的特点，已成为溶瘤病毒研究领域中常用的病毒载体之一。在对HSV改造时，一些常用的位点包括ICP34.5（RL1）、ICP47、US11、TK等。

劲帆医药拥有来源清晰的HSV-F株，HSV-KOS株，HSV-129株，能够针对特定基因进行敲除，从而使病毒具备肿瘤选择性。此外，还可以插入外源基因，如粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、P53、PD1等，可增强免疫反应。

（2）腺病毒（AdV）

AdV在溶瘤病毒研究领域有着广泛应用，常见的改造位点包括E1A-CR2、E1B-55K、E1B-19K等。此外，还可以通过肿瘤组织特异性启动子驱动E1A等基因以增强病毒对肿瘤的靶向性。AdV还可以作为载体，用于构建携带外源免疫相关基因（如IL-12，IFN-γ，GM-CSF等）的重组病毒，从而激发机体对肿瘤的免疫反应。在临床应用中，AdV溶瘤病毒还可以与传统放疗/化疗或生物疗法（如单抗、CAR-T等）联合使用，通过多种途径的协同作用，增强对肿瘤细胞的杀伤效果。

劲帆医药拥有来源清晰的AD5，能够针对E1区、E3区、Fiber区等关键区域进行定制化改造，以满足不同研究和治疗需求。

（3）牛痘病毒（VACV）

溶瘤痘苗病毒对肿瘤具有天然的趋向性，为了进一步提升靶向性和特异性，目前主要采用两种改造方式：缺失痘苗病毒生长因子(Vaccinia Growth Factor, VGF)和缺失胸腺激酶(Thymidine Kinase, TK)。在现有的VV中，Western Reverse株、Lister株、Wyeth株和Copenhagen株被证实具有溶瘤特性，其中Western Reverse株溶瘤能力尤为突触。劲帆医药选用Western Reverse（WR）株，针对其J2R（TK）、A56R（血凝素）、F14.5等特定基因进行精准敲除，从而使其具有肿瘤选择性。同时，通过插入外源基因，如粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、白介素-6（IL-6）等，可以显著增强机体的免疫反应，提高溶瘤效果。

（4）水疱性口炎病毒（VSV）

VSV具有复制周期短、组织嗜性广以及人类自然感染概率低等优点。VSV溶瘤病毒的策略是巧妙地利用VSV对Ⅰ型干扰素反应的敏感性。由于肿瘤细胞中存在Ⅰ型干扰素信号通路的缺陷，无法有效抑制VSV的复制和扩散，因此病毒能够在肿瘤细胞中选择性地增殖并发挥溶瘤作用。

劲帆医药拥有来源清晰的Indiana VSV毒株，并且具备成熟的基于反向遗传学的oVSVs重组改造、拯救及扩增技术，能够为相关研究和应用提供有力支持。

（5）呼肠孤病毒（ReV）

ReV根据红细胞凝集活性MRV分为三种血清型：血清1型（T1L，Long）、血清2型（T2J，Jone）和血清3型（T3D，Dearing；T3A，Abney）。其中，无论野生型或改造后的呼肠孤病毒都能实现溶瘤作用。在临床研究中，主要采用野生型呼肠孤病毒联合其他抗癌疗法的方式进行治疗。

劲帆医药拥有血清3型呼肠孤病毒毒株，并且可以根据客户需求对ReV进行改造,以进一步提高其肿瘤靶向性和安全性，满足不同研究和治疗需求。

2. 溶瘤病毒定制化改造服务流程简介

客户提供：

● 病毒毒株或种类；
● 病毒基因组改造位点及改造类型（缺失、突变、插入、有无特殊启动子要求），最好直接提供插入基因的序列；
● 病毒滴度和总量需求。

3. 溶瘤病毒定制化服务周期

交付内容：病毒、荧光图、滴度测定报告、凝胶电泳PCR扩增鉴定报告。若有特殊需求，如病毒全基因组测序报告或可溯源性，价格和周期会相应调整。

1. 工艺开发平台

劲帆医药针对不同溶瘤病毒的独特拯救及培养特性，开发出一系列工艺优化方法，构建了完备的工艺开发平台。该平台涵盖了从病毒拯救到最终产品制备的全流程，确保工艺的高效性、稳定性和可重复性。

2. 不同溶瘤病毒改造、拯救、纯化及感染性测试

劲帆医药药效评价技术平台可提供溶瘤病毒产品功效、安全性和作用机制评估。我们有丰富的细胞模型和动物模型资源，可有效支持溶瘤病毒产品的体内疗效评估。

1. 体外药效评价平台

劲帆医药具备丰富的肿瘤细胞系资源，涵盖HeLa、HCT116、HuH-7、HepG2、A549、A431、TE671、K562等多种常用细胞系，同时提供个性化细胞系定制服务，以满足不同客户的特定研究需求。可提供各类溶瘤病毒产品药效评价实验服务，包括但不局限于细胞杀伤、转基因表达以及生物标志物表达等评价实验。

2.体内药效评价平台

劲帆医药具备成熟的疾病动物模型体系，涵盖同系肿瘤模型、异种移植模型以及自发肿瘤模型等多种类型，可用于全面评估溶瘤产品临床前功效、安全性和作用机制。拥有专业的研发团队和先进的实验设施，能够根据客户的特定需求，建立精准的动物模型，并通过系统的实验设计和严格的评估标准，对溶瘤病毒产品的有效性和安全性进行科学、客观的评价，助力客户加速推进其产品的临床前研究进程。

溶瘤病毒在不同癌细胞中的效果评估