利用我司不同AAV血清型病毒，模拟抗体阻断病毒进入细胞的生物过程，以检测血清/抗体对AAV病毒是否具有中和活性，及计算血清/抗体中AAV抗体的中和效价。

● 细胞选择：HEK 293

● 检测方案：AAV病毒与梯度稀释的待检血清/抗体共孵育后侵染细胞；48h后，使用全波长多功能微孔板检测仪检测各血清/抗体稀释度下的荧光强度，与未加血清/抗体情况下病毒的侵染情况比较，通过IC50分析，评价待检抗体或血清的中和效果。

● 客户提供样品要求：

a. 样本类型：血清、体液、玻璃体液等样本，干冰运输；

b. 样本体积：>30μl（特殊需求，可定制）；

c. 样本要求：无菌，乙肝、丙肝、HIV、梅毒、EB、CMV等检测阴性；

d. 种属：人、猴、鼠等。

图2 AAV2和AAV9血清中和抗体检测（TI法）示意图

采用Luciferase报告基因系统，模拟抗体阻断病毒进入细胞的生物反应，更加直观地、系统地体现中和过程，具高灵敏度、高特异性、高通量和高准确性等特点。

检测疫苗免疫后血清中和抗体的表达水平。

● 检测方案：通过Elisa的方法检测血清样本中的IgG和IgM表达水平，以此检测血清中抗体的表达水平。

● 客户提供样品要求：

a. 样本类型：血清样本，干冰运输；

b. 样本体积：100μL（可特殊定制）；

c. 样本要求：无菌，乙肝、丙肝、HIV、梅毒、EB、CMV等检测阴性；

d. 种属：人、猴、鼠等。

图3 AAV9血清样本总抗体检测（Elisa法）数据示意图

采用Elisa法精准检测样品中IgG或IgM等抗体的水平，灵敏度高。

劲帆医药还可以提供AAV中和抗体检测试剂盒，用来检测AAV5，AAV8，AAV9中和抗体。试剂盒包含检测使用的293T细胞，AAV病毒以及检测试剂。客户可自行检测AAV中和抗体。

参考文献

1.Schulz M, Levy DI, Petropoulos CJ, Bashirians G, Winburn I, Mahn M, Somanathan S, Cheng SH, Byrne BJ. Binding and neutralizing anti-AAV antibodies: Detection and implications for rAAV-mediated gene therapy. Mol Ther. 2023 Mar 1;31(3):616-630.