One-Bac 4.0系统-技术平台

One-Bac 4.0系统全新专利群

高安全性

One-Bac 4.0系统⽣产的AAV杂质少，⽆rcAAV残留。

高产率

50L生产规模下，One-Bac 4.0系统生产的不同血清型AAV纯化前后均保持较高产率。

高实心率

One-Bac 4.0系统终产品AAV实心率较⾼，可达90%以上。

高感染活性

细胞及动物实验结果表明，One-Bac 4.0系统生产的AAV感染效果较好。

BEV传代稳定性

One-Bac 4.0系统采用的杆状病毒表达载体（BEV）在多代次内的传代稳定性高

⾼回收率

One-Bac 4.0系统在从5L到200L的放⼤过程中，始终保持≥30%的稳定回收率，展现出良好的⼯艺放⼤性与规模化⽣产效率。

⾼浓度低聚集

One-Bac 4.0系统⽣产的AAV在⾼浓度条件下聚集⽔平低，具备良好的储存稳定性和冻融耐受性。

高可及性

One-Bac 4.0系统生产过程无需GMP质粒及高成本转染试剂，极大降低了AAV大规模生产的原料成本。

短交付周期

种毒库的建立，使得病毒生产的种毒感染过程变得快速简便

分析方法开发和质量控制

劲帆医药的⼀站式基因治疗CDMO服务平台，拥有专业且经验丰富的GMP质量控制团队，擅长方法学开发、确认/验证及合规检测，全面保障产品的质量。以下是我们可提供的质量控制的部分放行检测指标。

类别	检测项目	检测方法
鉴别和结构分析	DNA鉴别	Sanger测序、二代测序、三代测序
鉴别和结构分析	衣壳蛋白质鉴别	免疫印迹法、SDS-PAGE、CE、LC-MS
生物学活性	效价	基于细胞的体外生物学活性、动物实验
含量	病毒衣壳滴度	ELISA
	基因组滴度	ddPCR、qPCR
	感染滴度	TCID50
	比滴度	基因组滴度：感染滴度比例计算
纯度	总蛋白	microBCA
	衣壳蛋白纯度	SDS-PAGE、CE
	病毒单体纯度	SEC-HPLC
	空壳率	AUC、TEM、AEX-HPLC、SEC-MALS
	粒度检测	DLS
杂质	sf9宿主细胞DNA残留	qPCR
	sf9宿主细胞蛋白残留	ELISA
	核酸酶残留	ELISA
	感染性杆状病毒残留	嗜斑法、TCID50
	杆状病毒DNA残留	qPCR
	弹状病毒残留	qPCR
	特定工艺相关残留（亲和配基、Triton、Tween20等）	ELISA、UV、HPLC
安全性	复制型腺相关病毒	培养+ qPCR
	支原体	qPCR、培养法
	螺原体	qPCR、培养法
	内毒素	凝胶法、光度法
	无菌	薄膜过滤法、直接接种法
	异常毒性	小鼠豚鼠注射实验
其他物化性质	外观	直接观察法
	pH	电位法
	可见异物	灯检法
	…	…

完善的质量管理体系

★★★

✔ 覆盖产品全生命周期的分析方法开发质控平台

✔ 稳定性研究一站式服务

✔ 严格的产品质量放行管理

✔ 分析方法开发、转移、验证和确认

✔ 完善的质量管理体系，助力全球客户的各阶段申报

★★★
法规依据	基于ICH Q10的质量理念，遵循CMC活动的法规要求，打造符合中外GMP标准的质量管理体系。
文件体系	依据中国、美国和欧盟GMP要求,搭建覆盖质量、物料、生产、设施及设备、实验室、包装和标签六大系统的质量文件体系。
质量体系管理	以科学为基础，政策法规为准则，产品为主线，紧抓质量体系要素,结合CDMO业务特点，根据项目不同申报阶段的需求，配置合适的质量管理策略。
现场监控	严谨的生产现场监控机制，通过人、机、料、法、环5大维度把控产品生产质量关。
数据完整性	严格遵循数据完整性的管理要求,确保产品生产及检测过程的所有数据符合“ALCOA"原则。
验证管理系统	健全的确认与验证管理制度及流程，保障了产品质量的可控性。

高安全性：

经Illumina与PacBio测序验证，Bac/Sf9⽣产的AAV纯度⾼。

对三轮细胞培养后细胞培养液提取基因组DNA并针对rcAAV进行qPCR检测，1001U的阳性对照样品(wtAAV2/9)三轮扩增ct呈下降趋势，说明其rcAAV经过培养得到了扩增；sf9系统生产的rAAV2/9，接毒量1E+12vg，三轮扩增中ct无下降，且ct与阴性对照(NC)相近，未检测到rcAAV；HEK293系统生产的rAAV2/9，接毒量1E+10vg，三轮扩增中c也呈现下降趋势，说明其rcAAV经过培养也得到了扩增，检测到了rcAAV。

高产率：

50L生产规模下，One-Bac 4.0系统生产的不同血清型AAV纯化前后均保持较高产率。

高实心率：

One-Bac 4.0系统终产品AAV实心率较⾼，可达90%以上。

高感染活性：

细胞及动物实验结果表明，One-Bac 4.0系统生产的AAV感染效果较好。

One-Bac 4.0系统与HEK293系统⽣产不同⾎清型AAV-Luc相同MOI感染HEK293细胞表达萤⽕⾍荧光素酶活性⽐较。

One-Bac4.0系统与HEK293系统生产rAAV9-EGFP、rAAV9-mCherry转导能力【比活：物理滴度/感染滴度(TCID5）】比较。

BEV传代稳定性：

One-Bac 4.0系统采用的杆状病毒表达载体（Baculovirus Expression Vector, BEV）在多代次内的传代稳定性高，确保大规模生产时，AAV批次间高产率和高病毒活性的特征不变。

⾼回收率：